请问体转干的四个转录因子在细胞质中存在吗？

胡鹏飞

请问这四个因子的蛋白在胚胎干细胞的细胞质和细胞核中都存在吗？他们在细胞质和细胞核中是怎么转运的呢？谢谢

anminleiryan

我想，细胞质内是应该存在其前体的；因为蛋白质的翻译必须在细胞质内通过核糖体进行，经过加工后，这些转录因子重新返回细胞核内发挥功能

anminleiryan

回复 2# anminleiryan
' j% x8 L- d- n  r$ l' e
! u; ^- y8 {; j6 d- x& G至于他们在细胞质和细胞核中是怎么转运的，你只能通过自己有目的的查资料寻求答案了

军医

学习了

qizhi502

尽然命名为转录因子就是在核中存在了。蛋白合成是在胞质中的

胡鹏飞

谢谢大家！还想问一下，我将原核表达的这四个因子的可溶蛋白导入到细胞质中，核膜附近，可以发挥生物学功能吗？

ghfvcat

回复 6# 胡鹏飞
9 @( N4 N  u0 Z0 G( f! K. O" t( _0 V* W( H* T+ |- z

) |- \8 p. D* i3 _( ^3 u; j3 [    你是怎么导入的？转录因子入核才能发挥作用，丁盛有做过这种工作，蛋白诱导IPS

msliyv

这文章里好像没有提到用什么方法将蛋白导入细胞的。6 F. }$ N, ]- u, {# B
# P9 [8 b  b) [) b4 M
至于转录因子进核的问题，我倒不觉得是个问题。因为内源的Oct3/4, Sox2, Klf4, c-Myc表达时也是在细胞质中表达然后通过细胞自己的机制导向到核内。所以只要以合适的方法将四种因子的蛋白导入细胞质，有很大的可能这些蛋白会被运送到细胞核。' y+ ?' ]- V) B  W& q  [

: A- q" E3 ^  o  U9 F! k另一个问题是你用原核表达的蛋白有活性吗？你如何鉴定他们的活性？
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6 p% K# N+ ]" P* i回复 7# ghfvcat

ghfvcat

回复 8# msliyv / }$ O  t5 `1 \

3 \% V6 `/ _9 W; W" w+ i, c& K4 n; O- b4 e
     他用的是polyR融合蛋白，另外还可以用TAT融合，都可以进入细胞核。
2 m# X4 `0 K2 }: b7 P至于有机制导向到核内，我觉得在细胞外合成的蛋白导入细胞后并不一定可以起作用。以为细胞定位是在合成的过程中就决定了的，也许还涉及一些定位序列，而不是在合成成熟的蛋白之后才决定。8 W* h0 g. H7 |. v: j- t% X8 ]2 u. I  D
至于活性，这个问题不太好检测，我也不知道有哪些方法检测蛋白活性，貌似都是从功能上检测的，但这些因子不知道怎么检测，只能是认为可溶状态就是有活性的了。欢迎高人指点。你要有钱的话可以试试做晶体，哈哈
. u, M/ M, Y0 D导入蛋白的方法，你可以参见下面这篇文章

胡鹏飞

我先导入的TAT-EGFP融合蛋白，但是细胞核里面没有，都在核膜周围聚集，这是什么原因呢？