请问体转干的四个转录因子在细胞质中存在吗？

胡鹏飞

请问这四个因子的蛋白在胚胎干细胞的细胞质和细胞核中都存在吗？他们在细胞质和细胞核中是怎么转运的呢？谢谢

anminleiryan

我想，细胞质内是应该存在其前体的；因为蛋白质的翻译必须在细胞质内通过核糖体进行，经过加工后，这些转录因子重新返回细胞核内发挥功能

anminleiryan

回复 2# anminleiryan ' h( `1 J* B- D# p( V
% s3 H' e* H* D7 }8 ~
至于他们在细胞质和细胞核中是怎么转运的，你只能通过自己有目的的查资料寻求答案了

军医

学习了

qizhi502

尽然命名为转录因子就是在核中存在了。蛋白合成是在胞质中的

胡鹏飞

谢谢大家！还想问一下，我将原核表达的这四个因子的可溶蛋白导入到细胞质中，核膜附近，可以发挥生物学功能吗？

ghfvcat

回复 6# 胡鹏飞 % J# g1 m: \- @. M

6 s; W- Z2 D% p
8 P& O. _+ G. ?    你是怎么导入的？转录因子入核才能发挥作用，丁盛有做过这种工作，蛋白诱导IPS

msliyv

这文章里好像没有提到用什么方法将蛋白导入细胞的。
+ C! `7 X% \* N* }  b! l9 \
* m3 y6 i" ^4 ]3 v) S, t% c# R8 m至于转录因子进核的问题，我倒不觉得是个问题。因为内源的Oct3/4, Sox2, Klf4, c-Myc表达时也是在细胞质中表达然后通过细胞自己的机制导向到核内。所以只要以合适的方法将四种因子的蛋白导入细胞质，有很大的可能这些蛋白会被运送到细胞核。
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2 P) ]$ a- i. \* }# z另一个问题是你用原核表达的蛋白有活性吗？你如何鉴定他们的活性？) S9 x4 n; A7 `& c& ^7 S$ ^0 X

1 w6 S3 \( ?9 Q9 ?! b2 q回复 7# ghfvcat

ghfvcat

回复 8# msliyv
/ S& y- \% S/ A* r; n
$ ]' k: ]6 \% s5 T0 @: x. n
: ^3 \* v( a) w" F     他用的是polyR融合蛋白，另外还可以用TAT融合，都可以进入细胞核。
2 m6 Y- x7 C& q- g4 n8 q: [至于有机制导向到核内，我觉得在细胞外合成的蛋白导入细胞后并不一定可以起作用。以为细胞定位是在合成的过程中就决定了的，也许还涉及一些定位序列，而不是在合成成熟的蛋白之后才决定。
. A% k7 f3 T! A( S( r4 y  H- Y* Y至于活性，这个问题不太好检测，我也不知道有哪些方法检测蛋白活性，貌似都是从功能上检测的，但这些因子不知道怎么检测，只能是认为可溶状态就是有活性的了。欢迎高人指点。你要有钱的话可以试试做晶体，哈哈
8 x1 h) B- ]$ v. C; d导入蛋白的方法，你可以参见下面这篇文章

胡鹏飞

我先导入的TAT-EGFP融合蛋白，但是细胞核里面没有，都在核膜周围聚集，这是什么原因呢？