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- 威望
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- 6142
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本人原代操作步骤为：1、处死小鼠，75%酒精泡5~10min，并准备3个盛有培养基的皿。& y' E8 U4 Q& W, d& O e
2、先初步分离小鼠的股骨、胫骨和肱骨，放入第一个皿中。) g9 d. P) ^8 s; K
3、仔细出去骨头上的肌肉和筋膜，放入第2个min. U1 x& B& C5 ]9 d- U
4、减去骨的2端，用1ml注射器吸取培养基吹出细胞，只到细胞泛白。9 y! B: F+ Y# H3 o3 V/ L
5、收集第三个皿中的细胞悬液，800g 5min，去上清
& v$ @. u5 k2 M. u) O6、制备单细胞悬液，接种到一个皿中。
+ ]; x. q8 Q' U% N% _4 _6 H# Y今晚刚做到这里，不知道明天结果如何，以上步骤如有不足的地方欢迎大家指出。2 O& ~# v, v9 h+ ^# F* L1 t5 X" N. {
此外，个人觉得仔细分离骨头上的肌肉时，将其放入75%的酒精中泡几秒会比较容易剥离，但至于是否会影响到里面的BMSC还不知道。 |
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发表于 2010-4-20 23:13
