MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？
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越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？
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谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客 % D: R4 q8 t0 ?
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MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。8 F. `! {) m  e; v
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不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。
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我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj 2 |9 l- f* `: K0 K0 o
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9 ?2 s  e) }$ K$ h, v- p& ]* ?    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。
  D6 I( W8 S" w  P8 V: o2 ]另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj 1 G  M$ g' E$ b

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$ c  N* a: F. z) B1 }. p( D% N    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 .../ t! {# N9 U4 a' ~
xjya 发表于 2010-6-30 16:54

- t4 Z  o' p5 h! v4 M( i6 N9 ^  b4 E5 [# ~! b7 s
谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？
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这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客
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MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。2 z! r  j; s* ?$ `: [
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不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...
; v  ^3 v. I6 ~( g9 j+ _, yshewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。
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我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。2 A6 w. [4 v/ ], S& N( w) G3 A, t
# r3 P  ^& S/ l0 A, B) ?
最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。$ _5 E; x: R" U/ n* N% Y; u

, t) ~, g9 U% s扩增不出来 反而 是  有问题的 。