MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？
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越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？9 h* B  P- j- n7 A6 A
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谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客
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MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。$ h; h; B6 O" `
( M+ t  @. H  p% b
不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。
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我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj # I% C$ E( D) Y, x+ ~/ F+ F- z
1 \8 F" S- i" r2 L/ M

  \$ D! A, I& a5 \& Q4 Y3 ?    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。+ o+ P% n  t/ p, S) f1 _! _7 r! x" J
另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj : S9 a4 A; [9 ~4 B1 D6 x! o) n

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    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...
# }1 B9 d" g5 d4 [( Lxjya 发表于 2010-6-30 16:54

  ^5 u8 S0 u9 N% W6 o& e
) _, B' K( f0 W2 _3 ]2 ?
谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？4 S6 s  m9 Y" Y8 v: [7 R
: B7 c) }0 u. s. I; C& e
这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客
" p' w, {& D3 T+ E" e$ A
$ S' b( b  E5 Z/ w0 ]MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
; O- b, I; Z- S+ q/ o0 d/ C, V7 G% o. D  R2 s1 S& ?. R  o
不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...
4 g& @+ q% _5 ]: F2 X: [shewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。! n. H6 U+ n0 h' K$ M& F2 T' h

% F. O- y; l+ B" E3 R' ?我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。
  {" P4 X+ L, d' R# ^0 d! U5 S' Y+ r* }; f* y
最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。# u) B$ s3 y: }, g
) K9 i2 O; M* {
扩增不出来 反而 是  有问题的 。