干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 干细胞实验室技术交流 ips专区 重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什 ...
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 46125|回复: 10
go

重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什么没有做?   [复制链接]

Rank: 4

积分
1266 
威望
1266  
包包
2111  

金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-7-14 15:28 |只看该作者 |正序浏览 |打印
重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什么没有做?. b0 d* n* }# _. T) _9 q" F

9 D+ F8 v+ u1 X( ?- n
8 ^  c) V" G& _. @9 |# q既然证实了  转入四个基因 以后 会发生重编程,那么没有转入的细胞是不能编程的。
+ v" y/ \/ z2 Q7 d" {5 N! y+ U% {8 q& R/ d+ U) ]2 m
iPS 都被转入了四个因子吗 ?   
0 I8 ]2 B6 g. c
& D9 I+ _: B) N
5 Z' |% G1 f  z5 u& Y$ s0 `现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?
5 O1 F% Z1 J' P7 S, V& S
& x# A$ u( }' O. {/ x( [. P5 o0 p: A* }) ~7 L* }# @# v
或者干脆用  ES培养基来 养 MEF细胞 ,养14天 ,会是什么结果?  以前没有人这么做过吧  ?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
87 
威望
87  
包包
469  
11
发表于 2010-7-16 22:05 |只看该作者
很困惑,纠结ing

Rank: 2

积分
87 
威望
87  
包包
469  
10
发表于 2010-7-16 22:04 |只看该作者
不知道事实是什么样子,至少在无重编程因子存在的情况下的确是可以产生类iPS克隆的。也不认为会犯什么naive的错误,我看高人刘有话说,虽然有些观点也不敢苟同。

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
13511 
威望
13511  
包包
32034  

论坛元老 优秀版主 专家 金话筒 精华勋章 优秀会员

9
发表于 2010-7-16 21:14 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
正如8楼所说的,我也有这点疑问,难道这些世界著名实验室的大牛能犯这么naive的错误吗?

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
475 
威望
475  
包包
1809  

优秀版主 金话筒 美女研究员 新闻小组成员

8
发表于 2010-7-16 20:41 |只看该作者
回复 7# amazingt
4 C1 Y" ]; y6 J, @0 H$ ~" {" `+ s4 l' t4 C, @- ]* Q
1 @7 X/ p; o& o0 q' C6 T
    可是,如果如你所说,任何因子诱导,都有可能出iPS克隆,但事实却不是这样,kamanaka的那篇文章及后来人的实践都是遵循这一规律啊

Rank: 2

积分
87 
威望
87  
包包
469  
7
发表于 2010-7-16 19:05 |只看该作者
"干脆用  ES培养基来 养 MEF细胞 ,养14天 ,会是什么结果?  以前没有人这么做过吧  ?"5 `  y; x, I6 m- Q/ B0 o
5 |) C, h" P8 i% z; f
我做了这个,作为阴性对照。可是和双刀的猜测正好相反,有类iPS克隆出现。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1266 
威望
1266  
包包
2111  

金话筒 优秀会员

地板
发表于 2010-7-16 12:30 |只看该作者
楼主,请问你说的“现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?”是指哪篇文献?谢谢!我认为,如果 ...
' I4 w5 y/ e3 e) Y  s, m双刀 发表于 2010-7-16 10:51
" w$ s6 z/ c5 ?0 d+ L
3 f9 o0 Q; K+ j8 U) h! N7 y& K7 `
新闻版里去找线索 吧 。
5 ^  W) q6 C4 i+ m5 H# Y- v
' y% ~5 K3 ]0 T" S# i4 Y& S) ^( dMEF 里 就一定 没有多能干细胞吗?  为什么非要重编程呢?如果本来就存在多能干细胞呢?     你怎么排除 这个阴性对照的问题呢? 用什么方法呢 ?
; K- R+ f+ v+ n" X! c$ j- e9 z 诱导过程中出现的克隆就一定是  重编程的细胞吗 ?你 说是,那你用什么证明你的 细胞是经过重编程的 呢 ?+ C0 {4 E( C% K2 a2 H2 S

2 P5 _  y/ i* U1 O* z我想起来一个科学笑话。
# s7 ?6 P" ]" y! F: p; U+ \
" R2 H6 ]/ l( i: x$ {2 D一个科学家说 :我发现了一个非常有意思的 现象 8 Q# m2 b* Q) d/ p
  我做了一个实验: 我对跳蚤说跳,它就跳了起来。  然后我把跳蚤的腿都弄断了以后呢 。  我再 说跳 ,跳蚤置若罔闻 了 。所以结论就是: 跳蚤 腿没了以后就变成了聋子  。
8 C, Z6 y/ S" e0 e6 T$ b
6 m1 k3 D- g, b0 t5 [( ~    : R8 j6 _7 y; l8 `! b# y
所以我认为 山中这个SOUTHERN没有做 是绝对的失误  。我觉得经费问题应该也解释不了这个问题 。 毕竟他 150种敲除小鼠都做了 ,  做个 SOUTHERN 是没有什么难度。! m7 N3 \/ a) q0 ^8 q4 K% U
     SOUTHERN  是唯一能证明 iPS细胞是 转入了四个基因的细胞。这个也只是必要条件,还不是 充分条件 。        : P+ F% u' F: r8 s* w4 h2 n

1 s5 w: i& Y  f5 w8 x: N1 Y  他这篇文章的附录里列了外源基因的  PCR引物,但是目前没看见  PCR结果 。 看过的同学   请  指出  。谢谢。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
106 
威望
106  
包包
496  
报纸
发表于 2010-7-16 10:51 |只看该作者
楼主,请问你说的“现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?”是指哪篇文献?谢谢!我认为,如果是空载的病毒载体应该是不会诱发重编程的。ES培养基直接培养应该也不会得到iPS,因为ES培养基中的成分并没有诱导重编程发生的能力。个人见解,如有错误,请指正
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
205 
威望
205  
包包
870  

优秀会员 金话筒 帅哥研究员

板凳
发表于 2010-7-15 22:04 |只看该作者
小分子物质诱导也是同样。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
496 
威望
496  
包包
2481  

优秀版主

藤椅
发表于 2010-7-14 23:57 |只看该作者
想法不错,你可以试一试
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-29 15:26

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.