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苏木精染色' a: Q! L% [9 _1 Z
【中文名称】苏木精
3 L! N* D7 U6 B: K【英文名称】hematoxylin;h(a)ematine% k8 z# v8 ?( q' \0 @4 R8 \; ?
【性状】
( Z: m+ ?3 h2 k i, w/ q6 U 无色棱形晶体，遇光变红。
0 H/ E0 I& z O1 d9 p【溶解情况】2 a9 N& f& |; \
难溶于冷水和乙醚，易溶于热水和热乙醇，溶于碱、氨和硼砂的溶液。8 T+ r( V3 B2 s/ b4 n, q
【用途】
) B/ \9 [1 d6 B% j# g 一种天然媒介染料。用于蚕丝、毛皮和皮革的染色以及棉布的印花，用不同的媒染剂可得到蓝色或黑色。与重铬盐、铁盐、亚铁盐、铝盐和锡盐等一起可制成各种色淀。在分析化学中用于比色分析、显微镜分析，并用作pH值指示剂，变色范围5.0～6.0，由黄色变紫色。苏木精(hematine)为碱性染料,将细胞核染为蓝色;
. Z6 B1 y; v, ~【制备或来源】 k; a" j0 D; m( a
由苏木树的木材获得。
9 m9 z( ?- m w8 H/ w0 t【其他】! I0 ]4 C1 G# \% @, g
含有3分子结晶水，在100～120℃溶于本身的结晶水中。在水溶液中，特别是在碱溶液中易被空气氧化成红棕色的氧化苏木精。
1 y+ v5 g% i2 T 常与伊红配合，苏木精将细胞核染成蓝色，而用伊红（署红）将细胞质染成红色。
j% M+ Q8 ^ o3 C6 {; ]# M 溶液要避光保存。* p( Q% F$ k; Z W
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配方：8 G- V" X+ j; H2 K8 u
苏木精的染色液有很多，如通用的苏木精染色液和各种改良后的苏木精染色液等等。
2 b+ C( P; H7 W) A$ i# F4 I一，改良的苏木精染色液一
3 F; `, s# ]: l, O/ N; h4 Y 材料 苏木精2g，无水乙醇250ml，硫酸铝10g，蒸馏 水750ml，碘酸钠0.5g，柠檬酸1g。方法 将苏木精溶于无水乙醇，将硫酸铝溶于水，两液混合加热煮沸2min，加入碘酸钠及柠檬酸。优点 此液存放时间长，染色力保持时间长，染色效果好。
6 H! U5 U; D1 r% f @0 d 用硫酸铝替代钾明矾染液久放也不会产生沉淀、结晶，不用过滤即可使用。此液存放时间长，染色力保持时间长，经过我室比较，使用时间可比哈瑞氏苏木精染液长一倍。1g苏木精配置的染液是哈瑞氏苏木精染液的两倍，更加经济实用。此液染色效果好，染色时间3～8min，特别是染色质显色清晰，但应注意一些染色技巧，配置盐酸酒精分化液时，浓度稍低，一般控制在0.8%左右，分化时间稍短，应在30s之内。氨水配制成1%，返蓝时间要较长，一般控制在1～2min，充分水洗后再进行下面的染色。
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二 通用海登汉氏苏木精染色液
9 H: `6 D( o' G: e9 N9 h海登汉氏（Heidenhain's）苏木精染色液，又称铁矾苏木精染色液。 5 Q M6 b2 P! i
配方：甲液（媒染剂）： 硫酸铁铵（铁明矾）2-4g ；蒸馏水100ml （必须保持新鲜，最好临用之前配制）。, z- Y" U: d( p1 s# ]$ y4 c9 m0 p
乙液（染色剂）：苏木精 0.5-1g ；95％酒精 10ml；蒸馏水 90ml 9 S; a1 f+ d0 E7 A( C' M# g
配制步骤：
. E0 j+ m' l9 i, d（1）将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，使其充分氧化（通常在室内放置两个月后方可使用）。3 m; i0 U- c* i
（2）加入蒸馏水，塞紧瓶口，置冰箱中可长期保存。 7 l2 S3 n7 ^! U8 }" o
切片需先经甲液媒染，并充分水洗后才能以乙液染色，染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。 铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂，但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。
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配方三：苏木精水溶液 ( V0 B9 J7 z' R) v5 Y
0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。
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配方四：代氏苏木精（Delarfield’s haematoxylin）
5 R5 \3 Q. |/ u' n/ ^2 ^) J* @3 C8 N甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml 3 H$ N$ g' P1 F
乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml
3 z5 h$ {7 Q6 V/ A |, a' }丙液：甘油25ml + 甲醇25ml / o4 Z& a/ I c/ |
分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加入丙液，混匀后静置1~2月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。 ' ]8 v+ _9 A" x( i- x/ c# ?+ O6 F9 t
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配方五：爱氏苏木精（Ehrlich’s haematoxylin）
( R/ x% [& o' w9 [. M7 W苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾（钾矾）3~5g。配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾，边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中，用纱布封口，自然氧化1~2月，至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。
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: T4 H Z A/ T" U1 F染色方法：
/ G w- s; `6 S$ d一 石蜡切片的苏木精-伊红染色法& n! `1 `2 S# `( N0 H1 v' J5 P
（1）切片在二甲苯中脱蜡5～10分钟。+ o. T' q3 P. N9 L, H7 d/ h3 m
（2）移入二甲苯和纯酒精（1∶1）混合液中5分钟左右（如经二次二甲苯脱蜡，此步可略）。 `0 f [3 p3 |
（3）入100％、95％、85％、70％酒精，各级为2～5分钟。最后经蒸馏水转入染液。
4 K) ^. n* o: q6 b" t2 F（4）苏木精染液染色5～15分钟。、& ?" t, T3 E3 L! s+ [5 X
（5）水洗玻片上多余染液，0.5～1％盐酸酒精（70％酒精配制）分色片刻。镜检控制，直至细胞核及核内染色质清晰为止，约数10秒钟。7 H5 D8 A; m; P& E u
（6）流水冲洗15～30分钟，或者在碳酸锂饱和液中短时间碱化或蓝化，即细胞核呈蓝色。（7）蒸馏水短洗。
6 _; B6 o, @" g$ W, U: u5 w" O: o（8）0.1～0.5％伊红染液染色1～5分钟，若着色困难，可在每100毫升染液中加入1～2滴冰醋酸，使易着色且不易脱色。% c) P- ?. w" P2 \2 ]/ Y
（9）依次经70％、85％、95％、100％酒精脱水，各级为2～3分钟，在95％以下浓度的酒精中伊红易脱色，应适当缩短时间。
1 U$ w, j/ D2 y# x; X8 [（10）二甲苯透明（二次），共约10分钟。$ z! ~& \! u8 ?7 K1 f
（11）封片：擦去切片周围多余二甲苯，切勿干涸，迅速滴加适量中性树胶，再加盖玻片封固。4 R/ q& ^$ {" N2 m
$ ~' Q, ? }+ P2 ?7 F U+ m还有其他很多的苏木精染色的方法，主要是用于对染色体的染色，基本方法都差不多，大家实验室都有我就不啰嗦了。 |
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总评分: 威望 + 12
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发表于 2010-11-17 14:03
发表于 2010-11-17 16:17
