请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

牙牙丫丫123

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请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

zerollx

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' w* q  L& s( S0 H5 }4 D1 }, w三胚层的鉴别- b" h. f( X8 Q4 @
  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
' ^1 k, q9 `7 I: |   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标; Y$ ^( B! |' h4 U/ W) v' j' E# v3 l
志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin$ o. @" ^4 E) M" e
3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。/ @% e- a" i4 V8 m7 L; W
     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达5 R" W6 |. K9 U4 K( V/ k' y% G
    中胚层：波形蛋白等& P- f0 _& x$ K
    外胚层：巢蛋白等0 c% m6 w+ b, A0 m- F' W
   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式

牙牙丫丫123

呵呵，不错……
, g2 R7 w% j9 K) e$ [

iyaofying888

非常好呀

coralqin

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

细胞海洋

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, I& C/ i( w/ a. L- i欢迎原创作者 发表意见

jjjk127

好东西 ，学习:)

lp871

:D:D:D

shuishan

请教各位大牛：想做IPS向心肌细胞的诱导分化，请问形成EB后贴壁生长多久可见到心肌细胞，是不是可以见到心肌细胞跳动？上面说15天左右可检测到心肌细胞特异性标志蛋白c TnT，若想用分化的心肌细胞做下一步实验，是不是只要检测到了这种标志就可以了？怎样将其纯化了？好像心肌细胞是不可再生的，那这样分化得来的心肌细胞能否进行传代增殖呢？

细胞海洋

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