请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

牙牙丫丫123

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请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

zerollx

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- c+ a7 c9 O0 F
* A6 X7 T1 K) K  z- M* d0 l三胚层的鉴别
6 B) @5 H  F  o4 @% r4 p' Q  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。5 G: R3 F) D" I2 r
   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标  O# T9 l* P3 m# V1 }+ l' _
志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin
( R( _" v1 V+ P& R' i2 B$ a 3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。5 Y* u- X. T/ ?6 M. ]5 ^
     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达
8 i7 \1 s( A$ E& J# ^    中胚层：波形蛋白等
) b2 P3 q9 q% P8 |    外胚层：巢蛋白等
1 p1 d1 s, e; V   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式

牙牙丫丫123

呵呵，不错……
& L% R* J2 A: }; p. S' R

iyaofying888

非常好呀

coralqin

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

细胞海洋

回复 coralqin 的帖子% ]4 R9 f0 t1 U1 j: y1 e3 K( s
1 U3 c! x* H% t
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jjjk127

好东西 ，学习:)

lp871

:D:D:D

shuishan

请教各位大牛：想做IPS向心肌细胞的诱导分化，请问形成EB后贴壁生长多久可见到心肌细胞，是不是可以见到心肌细胞跳动？上面说15天左右可检测到心肌细胞特异性标志蛋白c TnT，若想用分化的心肌细胞做下一步实验，是不是只要检测到了这种标志就可以了？怎样将其纯化了？好像心肌细胞是不可再生的，那这样分化得来的心肌细胞能否进行传代增殖呢？

细胞海洋

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