CIK的高效扩增技术

realinter

CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要，在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题：2 [. A1 m( r2 z, T( E. E
现有的方法：# n  [% A" _" R* |$ A7 Z, }
D0：IFN-r 1000u/ml
2 Q3 o4 X9 C9 J3 b7 Y1 ?D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml' ]+ r9 g9 a: Y1 N% z
以后每两天补充IL-2 。+ K+ p$ Q/ q# w5 I
还有看到文章使用IL-1，IL-4等等的。: Q1 @- T; J7 y6 t/ K3 P
谁有更好的方法，欢迎讨论！$ \! H# _1 S( B3 S# I1 O7 q

get0715

我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思，您能告诉我一下OKD3是哪种因子么？

deron

回复 get0715 的帖子* V2 [$ F5 k' G  e+ F; }
& K2 l& }7 g  s" z% r! F
CD3又称OKD3: t; g1 }, {8 m5 t) }6 L- \

deron

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, K/ X" T! W1 ^: V) p: ?) h) O- T; B6 b9 U
多数文献报道说IL-2的量调至300U，也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过，不知道成效如何

yunshi503

改进的方法是用CD3包被培养瓶，然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml

realinter

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6 W$ m* r' r3 i, B  u) |- ~8 Z0 @- U/ r! I4 l, w! {
恩，看过相关的文献，那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢？
/ g. I7 r" Y( l& ?. l. G6 p怎么去包被瓶子呢？能分享具体步骤吗？谢谢！

sky512829

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' _" O. g3 F# o
. T) f! T2 K4 x; a) Q这个方法可以，我正在用

sky512829

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* B; v3 Z7 b% ~/ c9 t8 G% m" f4 s$ ?6 M% Y
瓶子一般包被过夜用，如果急用可以包被4个小时左右，用的时候，直接倒掉包被液，用PBS或生理盐水清洗一遍，再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了

sky512829

回复 realinter 的帖子9 r+ R) Y8 X$ f$ T) m' t6 ?5 d
9 O4 Q/ I- D7 m  d3 {0 \
一般都是包被过夜第二天才用的，急用可以包被大概3,4个小时也可以了，用的时候倒掉包被液，20mlPBS洗一次，然后再用20ml培养基洗一次（175的瓶子）就可以直接加细胞养了

sky512829

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/ {( s, s8 t: v6 s9 r1 @! x
2 r4 k3 U$ I- V' u9 M" G2 w应该是叫OKT-3吧