求原因。PCR怎么会多跑出一个条带？有图......

熊猫猫

今天第一次跑PCR，没用内参，只跑了目的基因(217kb)，左边是我跑的结果，为什么会多出一个条带来，而且比目的基因还亮些？
/ J4 X  E' z- g. |  H; [还请给位指点啊......

snickle

建议设一个阴性对照试一下看看

殆死悲爱

回复 熊猫猫 的帖子/ n# a/ ]3 i+ A8 m

1 |, g6 X9 b/ J; X" I, k非特异性杂带，可能是引物设计的有问题。我只是个人猜测，因为不知道你的模板是啥？

熊猫猫

回复 snickle 的帖子; b( _# g; T8 ~: i% B7 O

: l; R. U- {' C3 i, K6 \请问什么是阴性对照呢？

dulaiyouyu

看来引物没设计好的样子。跑胶还得有个阴性和阳性对照才好啊。。。

熊猫猫

回复 dulaiyouyu 的帖子# `8 d* @7 [7 Y( u. D% q" o
) y  z- e0 H% o" e! P$ d
请问什么是阴性对照呢？

snickle

阴性对照，不加模板，和你的样品一起扩增跑胶

熊猫猫

回复 snickle 的帖子% Z5 t5 Z, G( d' u

4 ^9 X* [4 J# E* X" I刚才在网上也看了下，不知道对不对
9 p" c  n; x: ^4 w阴性对照：逆转录时不加目的RNA，用水代替
2 Z. a: |# y! ?% d) d+ a) ~阳性对照：逆转录时加目的RNA

jun8013

引物二聚体？

jun8013

应该就是引物二聚体