求原因。PCR怎么会多跑出一个条带？有图......

熊猫猫

今天第一次跑PCR，没用内参，只跑了目的基因(217kb)，左边是我跑的结果，为什么会多出一个条带来，而且比目的基因还亮些？, `1 F& W& D7 M6 P# I; ^# M
还请给位指点啊......

snickle

建议设一个阴性对照试一下看看

殆死悲爱

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. A4 [$ k& s: l+ u2 K, h4 Z: a* @3 }' p9 O5 F: J  m
非特异性杂带，可能是引物设计的有问题。我只是个人猜测，因为不知道你的模板是啥？

熊猫猫

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3 h+ ], f; O( r+ k5 Y4 b7 W; q9 A
请问什么是阴性对照呢？

dulaiyouyu

看来引物没设计好的样子。跑胶还得有个阴性和阳性对照才好啊。。。

熊猫猫

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请问什么是阴性对照呢？

snickle

阴性对照，不加模板，和你的样品一起扩增跑胶

熊猫猫

回复 snickle 的帖子1 _$ d) k3 }" g  g( Y& g/ @

% q# I. ]. L$ R刚才在网上也看了下，不知道对不对
# P# Y+ `. I! g/ k% t3 O& c: q阴性对照：逆转录时不加目的RNA，用水代替
- A+ d. C( v# T& P5 }阳性对照：逆转录时加目的RNA

jun8013

引物二聚体？

jun8013

应该就是引物二聚体