逆转录病毒在293T细胞中包装，一般多少时间收病毒啊？

刘森泉

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7 g2 f& r. u: \逆转录病毒在293T细胞中包装，一般多少时间收病毒啊？已经两天了，293T细胞看起来状态已经不行了，可是我的备转染细胞还没长好啊！能不能放到第三天再收病毒转染啊，还是需要今天收病毒，冻存起来？冻存对病毒滴度影响很大吗？谢谢！

囡囡

一般48h、72h收病毒，如果到72h可以先收了，放4度一个星期都可以做，放-80能保存一个月，但滴度要降一半

trl137

一般是48h,72h各回收一次病毒。你在做转染时，一定要控制好细胞的密度，这直接关系到转染效率。

huangcong1988

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: Z/ Q" l, c& d9 ~; O3 }
& i* e5 ?1 z5 {% A2 z病毒上清是能东村的，只是冻存后滴度会有降低

huangcong1988

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1 }, ~& e6 _+ O: P% U$ d1 r- X1 I+ N
不是吧？冻存一次滴度降低一半？是20%左右吧？怎么会那么高呢？

huangcong1988

逆转录病毒转染细胞，细胞生长肯定会受到影响的
8 {! V4 R5 V7 ~$ s# y但是，如果要收集病毒上清的话，就不能考虑细胞状态问题的
% O( [4 a& ^: [. w% A3 N48h之内不要换液（除了刚转染后6h的时候需要换液一次）
( p; h/ V0 J; x8 q48h收上清就行" }' M- d* @2 Q5 n9 D& D
有的说72h收也行，我感觉不太好，因为我48h收的时候培养基已经全黄了

zpzp0312

回复 yangpan521 的帖子# ^! B) V1 n, a

) r, F4 K) L) Z% G2 s可惜了，你老师不懂

rexhz

你们的慢病毒都是用原液做吗？有做慢病毒浓缩的没有?

王乾

病毒液一般转染完8-12小时换液，一般12小时就已经有病毒产生了，收病毒的时间一般是换完液36-48小时，也有人推荐36小时收一次，72小时再收一次混在一起用。另外病毒是可以冻存的，一般是液氮速冻，溶的时候好像速溶和慢溶都行，我测过冻前和冻后的滴度区别，一般冻融一次滴度会降低为原来的一半。病毒感染一般的细胞滴度一般不是问题，但感染ES滴度就不要太低，怎么也得10的6次方吧。

guo6259

很负责的说是48h和72h各一次。但关键是保证293T在转染时是70%融合的。要不72小时就长的太密了。
( [# \8 R+ ~7 Z293T是关键！！
. H2 d4 q  B6 f/ T* t至于收 的病毒-4度放一个星期也没什么问题。