急！急！急！急！CIK细胞实验中出现的问题？？？？

hwlightning

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3和IL-2好像没起到作用，4 @9 W' I6 K; C3 ~7 E
一直贴壁，吹不下来。6 ?( J, P; |; \  Q
CIK细胞不是悬浮的吗？为什么会还含有那么多贴壁细胞，如果贴壁细胞多，悬浮细胞就少，成团就会更少，和面再补加一支CD3也不起作用。
/ C; s) |  j% D9 i" o还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，细胞团也会凋亡，这会是什么原因？

ly200101042

我也遇见过这种情况 而且有时候细胞贴壁还变型了
/ S1 w8 W0 I5 Y& I0 ~3 C- H是不是细胞太多太挤了啊 有时候我要是分的细胞多 就会出现这种情况啊

hwlightning

回复 ly200101042 的帖子
, E, C+ x* P2 a$ Y8 q( X% u$ h/ V( u3 X  B2 h6 t; ]
CIK细胞应该是不贴壁的，也不会因为细胞多而变型，你分离的时候是不是红细胞很多，, O/ i. h( [# z7 H1 S! [
想过怎么去除红细胞没？

ly200101042

我用过溶血素 但有时候嫌麻烦啊

woosheng

/ z  }  [. C; {* e
& P( p. ?" k% T# j/ W2 f
可能是单核细胞。PBMC里有除了淋巴细胞以外还包含有单核细胞。单核细胞容易贴壁，分化成DC和巨噬细胞。
8 `' V) l1 B7 ^加CD3抗体和IL-2是没有用的。

lyj-0017

回复 hwlightning 的帖子
) m3 o1 {* }" H8 O1 ]7 Y8 O0 ?3 {, b! [9 d' Y+ s! r
你好，我们现在培养CIK液出现你说的这种情况。培养几天后，培养基颜色根本不怎么发生变化，培养液中也有絮状物，像是细胞成团，最后收集的数量非常少。你们现在这个问题找到原因了吗？是如何改善的呢？

ljl1988115

单核细胞比较多吧

meister

回复 lyj-0017 的帖子
& C  `! ^  L8 l+ |. k" ~( i8 p, M% Z1 E4 v
细胞不长，出现许多絮状，是细胞死了！

lyj-0017

回复 meister 的帖子
4 S& \: J7 J7 p& [/ d; M( ~3 X4 J9 }) ]! y2 d  U# E
那么，细胞为什么会自己死掉了呢？是细胞因子没起作用？还是因为营养不足呢？或者别的什么原因？

meister

回复 lyj-0017 的帖子
& W9 X% K5 ^. X) @* ]5 {. L  {/ A
, g# j3 {" g$ x# v" u8 G细胞会死掉，主要是两个原因， 一是培养基问题。 二是细胞密度过高。4 y4 R% v1 G: x+ [& |& X8 T/ R
我估计你的是培养基有问题。看看IL-2是不是降解了。