错在哪一步，望赐教！------谈脐血分离MSC

542177563

具体步骤是：脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---一部分养在DMEM中想得到MSC，另一部分养在EGM中为了得到EPC（用的是培养瓶，没有铺胶）------可三天后换液（换液时没有发现贴壁的细胞）------换液2天后发现瓶中仍没有贴壁的细胞。结果什么也没培养出来，步骤中哪一步错了，望赐教！

sdwzg119

要说脐血MSC的话，一般是不会每份都能养出MSC的，不过我是听说~没自己养过~据说挺难养~

壹DD

1.试剂问题，) m+ }6 v# y, h" C& D
2.方法技术问题。
5 o. \  K& v" T" _0 H试问你的细胞敢用临床吗？% d+ F2 Z% s8 z; U$ M' t4 R
- [! U# h0 X$ N, ?  V6 }! P

Roden

脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---
/ D- C/ @6 |1 }) U. w/ {6 k楼主详细解释下这两步吧？为什么不直接密度梯度离心？

camus

跟楼上有同样的疑问

nankou2008

做过脐带间充质 组织块贴壁慢慢就爬出来了& K4 @2 Q9 _' m( t5 T# p6 q
脐带血干细胞也贴壁吗？

meister

回复 542177563 的帖子
# E' t. e/ S8 j: D0 U+ t6 ]7 z7 A5 n6 M8 A  t) z% [" w
是ＭＳＣ，EPC都没有吗？

camus

脐血间充质干细胞难道不贴壁吗请问？

hybaoyu

困难重重

542177563

回复 Roden 的帖子  _: |8 W6 U7 S) X& U1 W. I: P8 V- c

5 A7 Z. N2 K, K# ?6 Y- r这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞。