错在哪一步，望赐教！------谈脐血分离MSC

542177563

具体步骤是：脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---一部分养在DMEM中想得到MSC，另一部分养在EGM中为了得到EPC（用的是培养瓶，没有铺胶）------可三天后换液（换液时没有发现贴壁的细胞）------换液2天后发现瓶中仍没有贴壁的细胞。结果什么也没培养出来，步骤中哪一步错了，望赐教！

sdwzg119

要说脐血MSC的话，一般是不会每份都能养出MSC的，不过我是听说~没自己养过~据说挺难养~

壹DD

1.试剂问题，0 C8 k$ _( W& o8 u
2.方法技术问题。
0 G* g: M) p* N' u5 O% X' k: P1 Z% T试问你的细胞敢用临床吗？
6 q$ t& j6 \7 Y3 X; H. `) s
2 T7 w5 p* H5 V0 [" N% J' w

Roden

脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---3 d3 a3 m. V2 m, D! N( Q
楼主详细解释下这两步吧？为什么不直接密度梯度离心？

camus

跟楼上有同样的疑问

nankou2008

做过脐带间充质 组织块贴壁慢慢就爬出来了
& A! ^$ K+ y/ U8 g3 O; {$ \" `3 U脐带血干细胞也贴壁吗？

meister

回复 542177563 的帖子
, b; w  y7 r; A6 Q) L) A* Q3 p0 L5 H) q1 X, o( `& q! x2 H; n3 S
是ＭＳＣ，EPC都没有吗？

camus

脐血间充质干细胞难道不贴壁吗请问？

hybaoyu

困难重重

542177563

回复 Roden 的帖子4 C9 u" F. a/ s/ @8 j

6 D4 o) D2 V- G4 m2 Y+ s这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞。