怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

chenchunlei

贴壁？最好能有实验操作步骤

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

chenchunlei

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8 C( K+ `3 _7 N/ L+ {% I8 A5 \4 P: L要颗粒细胞

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子: E6 ?7 K% j2 W3 P: B  j$ X
5 p1 G) @" A; h4 Q! _
什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

chenchunlei

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4 N# U! C) E% x4 G" {+ y. `就是将0-3d卵巢消化后怎样获得颗粒细胞# ~8 C  b4 K' x& ~

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子, m! h2 O1 R3 T' r3 n, X1 g( O. O
0 X4 ]/ e5 O( P( s; U
我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

chenchunlei

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3 H, M; ]$ f- @! f% g+ y3 Z+ Q  g2 u# y: |, q/ F
谢谢
2 L/ w- P/ B$ Q之前用了四个卵巢一消化离心后几乎没有颗粒细胞了

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子3 N. M0 u/ c8 i9 D; P: p; |% i) F

" G+ H' ?) r6 f如果这样的话，试试看不离心

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子$ @, P+ [( d) q, X
& L2 s2 n! M! o3 E; o1 ?1 e. G
那岂不会有TE在培养液里
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aulenuyah

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- v' w" p- I; h& f1 Z' y怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。