不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

weiyepan

PNK 就是 Polynucleotide Kinase，让你先加磷酸基到引物5'端再做连接的意思。我们的确有试过做shRNA连接不做PNK转化不长的现象，尤其是引物质量不好的时候。

zm19900508

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什么是PNK再连接，为什么要做PNK再连接？呵呵，麻烦啦

zm19900508

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哈哈，找细胞海洋？

weiyepan

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Stbl3的效率大概是DH5a的1/10，做得好的话。换一批Stbl3吧，得有10^8cfu/ug以上才好做。
& L* n' n# s8 b7 S2 W0 [( c要不然就是你引物没处理好，最好做个PNK再连接。

老十

晕，点了三下就回了三次，谁能帮忙删了多余的吧。

老十

回复 石山巨石 的帖子7 b* X7 F% g) G5 G8 |7 S$ Z

- ^+ o5 Q5 }6 [! m  F1 q: N只要lacZ没被破坏就行。一定要看plasmid 的图谱，puc plasmid 是被改造的很多，是否会留lacZ 不一定。

老十

回复 石山巨石 的帖子' o7 F, N' n( @: ^+ u  ]
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只要lacZ没被破坏就行。一定要看plasmid 的图谱，puc plasmid 是被改造的很多，是否会留lacZ 不一定。

老十

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只要lacZ没被破坏就行。一定要看plasmid 的图谱，puc plasmid 是被改造的很多，是否会留lacZ 不一定。

zm19900508

回复 wf78365421 的帖子" f: @! O+ p* F: `7 b6 t+ w3 C

  R. h* I* x  h' Q: m师兄说慢病毒载体最好不要用DH5a,很容易发生重组