不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
; E7 [! I" C3 R" z' N$ [& K
1 r4 j6 K6 V$ _9 w. \4 c0 w基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
( G; o- i. s7 `7 M, HTOP10菌株
- t% K2 }: U0 N( D/ o' E% N. R& Z# @  S$ [# t' j# b9 ?: {% a7 M
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。, q, w( e& N5 d4 o9 Z' M
* }1 U" [7 L$ \% m8 h, }; k
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG
' N0 P/ R- }# C7 Q* t) t8 W1 n4 f可以看看别人博客里写的4 k( V% R; U0 r4 ?
http://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。1 u( e- P4 H1 B: n  c) G4 }0 G4 u$ Z
TOP10转化效率低很多，不怎么好用。
8 V, o+ M6 @0 T: H0 w# a5 wStbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a
/ f, _5 E2 ~0 q; j- `- _效率是反过来的

石山巨石

回复 老十 的帖子; I% D7 f9 h% X& y. D' u

0 @. K/ K, K3 X- o4 V& @2 @请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

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. u' _  l" h6 {8 r3 L4 p  ]" `# X, X; u! s! q5 }# s
多谢哈

zm19900508

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, I7 ?" W- _. o+ I. E/ U6 d$ g3 K
. Y' s. \, j4 k0 l: [! Q% z1 }" m谢啦

zm19900508

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1 Z' `" j- z' A' z+ ?! ]9 t! R1 \- ]% C9 X$ f; \8 F! p
我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。
. D( \4 _, A: R1 X$ \DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。# O, h: _) V, }& h/ m" f, F
使用建议DH5a

weiyepan

回复 zm19900508 的帖子" D& V0 c5 q+ e, A- w( ]* A$ ^
" I8 ^5 S3 ]% P' [
shRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？