不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
: {  X- _6 ^5 Q# o( Z' |4 c+ b( _: }2 U
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
2 G* r0 y6 s5 H( v* [' y: }% oTOP10菌株+ |8 s: `# i) P
* o8 \( T# `! f# ?3 `/ q; n. c- y: v
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。4 h' Z9 v- {) z
( a) g4 p( |( d0 q) Q
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG! D6 m. z6 B. j9 m
可以看看别人博客里写的
- D% T9 _" I, A1 b3 Dhttp://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。) t0 N% Y& w9 ~" t  @
TOP10转化效率低很多，不怎么好用。
0 Y  s# C3 S9 q3 U5 cStbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a1 E- s3 f* n9 u% t+ s/ c
效率是反过来的

石山巨石

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; b) y' w& ~# h. b0 T4 Y/ q2 |3 i+ B5 n: _
请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

回复 老十 的帖子3 i# ^+ F0 J5 ^6 a, t* E
- k7 J! a& C8 p
多谢哈

zm19900508

回复 石山巨石 的帖子# u6 L& r8 S( w" w9 l! C& Z" Q
  f# `! F8 G" Y' J
谢啦

zm19900508

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5 f# t3 y- w$ V3 v* K' w
' u0 O" F& E$ x) d$ p+ v我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。
' q1 a8 a/ M4 T% }' }! x' UDH5a转化效率最高，适用于常规克隆。/ g' Q) ^6 Y2 X2 r5 Z% v- z9 b
使用建议DH5a

weiyepan

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- w- A$ R0 y& d+ D7 N' H- c9 q/ |) ^6 ?' U1 g
shRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？