造血干细胞流式检测结果分析

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# {6 u1 I" m3 M' M6 U. J3 N# y
0 i: J( [3 d! P4 W9 D我们此次是检测CD34+CD45+CD133，所以我们按三色的检测标准。) \$ \" X# L2 ]4 D$ g
1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞6 w- t) v4 x. L* i' Z8 i( h, w
2.FITC+PerCP+APC的补偿管，共3管
; T8 o# W5 D- k3 |3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体# S& t: H* ]& n( F
共5管

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回复 nailute1985 的帖子% C, D3 m5 f, h: j% C# `! c

0 N. d9 W: }/ @! T大部分门的设置没有太大的问题，有两处有疑惑，第一个在调补偿的时候，同型对照也就是阴性对照的管的划门位置（R1）怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里？

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% p7 b1 |) S  U9 R; c
5 z4 N9 K$ m# M9 E7 R我们是用调整过的R4（在FSC/SSC的散点图中，显示R5，把R4的图复制过来后，把门的左侧划到200位置）作为最终的结果，大概0.2%左右。

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  }7 b% Q4 N% N" t" z8 C' w) P* d% g- ]+ |3 w! M/ E( @9 D
都用同型对照了，还有什么阴性对照呢？难不成还得用细胞做阴性对照，不是多此一举吗？

nailute1985

最后cd34+ 0.8%正常啊

nailute1985

回复 SKC-SFC 的帖子9 X4 @1 c% V  L8 o
1 g+ ^" Z  \% V9 M3 o4 P- r
1、我的意思是在你做同型对照或者cd34+检测之前就得用阴性对照把补偿什么的调好了，然后你的isotype跟你的cd34+用的是同一个protocol 就不需要单独调了1 B; c/ w* z* i! u6 ^# z) w' h5 {
2、看你设的这些门没有啥大问题啊 你是哪个门不确定？
* \+ @1 c8 F. r4 K+ p

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4 r$ w# e$ L" G- J
; ]& v2 Q7 o& B; N

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回复 nailute1985 的帖子8 C. k2 o% R0 v: o; z3 r0 P

% K5 E" J7 R5 a6 k1.CD34的门？不是从FSC/SSC散点图画门后检测3个补偿管（3个抗体）进行调补偿吗？8 s  W2 m8 R: R% L# A
2.然后这个画门的位置在哪里呢？

nailute1985

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9 M9 k  ?8 E, v! q( m; b" y( V) J
% c/ S, k9 S' ]- _2 ^1、同型对照的门当然跟你cd34门是一样的 要不怎么叫做同性对照
; f: l/ H" D8 W* s  B2、这个需要看你用的是什么荧光材料了……1、2、3、4四个通道的发散光谱是不一样的。3和4差的比较多那肯定就不需要补偿啊，1跟4差的少，光谱有重叠，那就需要补偿。
, C! P9 F; w- K, d$ Z% z# B# O