siRNA连接何种载体转染大鼠骨髓间充质干细胞？

orchard

我最近想做大鼠骨髓间充质干细胞中的两个目的基因的沉默，同时还想做体内实验，但是分子生物学这块刚刚接触，有很多不懂的地方向大家请教。如果想选用RNA干扰的慢病毒载体做稳定转染，请问大家都有用过什么载体呢？

燕北飞

GV 慢病毒载体系列、pHelper 1.0 载体和 pHelper 2.0 载体三种常用质粒。

刘森泉

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请教下，做过表达的慢病毒表达载体和siRNA敲降的的慢病毒载体是一样的么？如果不是，两者差什么？

zack

刘森泉 发表于 2012-6-7 08:49 0 v% l( B: ?# H% o, w
回复 燕北飞 的帖子. H# G  p, g: Z. C0 V

4 a2 |/ [/ a' c: W) O请教下，做过表达的慢病毒表达载体和siRNA敲降的的慢病毒载体是一样的么？如果不是，两 ...

- }' v) c  ~, Z0 a% P: K
可以用同样的慢病毒辅助质粒去包装。

刘森泉

回复 zack 的帖子1 @1 c4 v5 |% \# \5 X, b
' Q( h3 }7 l7 E( f+ \( M, }/ R
辅助质粒共用是可以的，我意思是构建表达质粒的载体，对于高表达的和siRNA敲降的是否一样。谢谢！

燕北飞

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8 ]9 Q& M" a3 r0 E7 _; @- Y不一样，高表达的载体要选择好的质粒，对启动子的要求很高，如果想让过表达效果明显，需要包装腺病毒或者AAV。

刘森泉

回复 燕北飞 的帖子% \( C) O# O- B7 ^7 N' f

. w" r/ d% f" G) Q# `* ]1 g那可以用过表达的载体来构建siRNA的表达质粒？

燕北飞

回复 刘森泉 的帖子6 I3 L+ b/ B+ X; M: K% J4 i) v7 A
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如果质粒效果好的话，大家就不用包病毒了。

燕北飞

回复 刘森泉 的帖子( _5 u1 m4 y( l$ u* @" \9 a# S+ `

9 y3 z1 {" x8 r* d- o- o: [  `3 J关于质粒和病毒的分类和功能，我这里就不想多说了，病毒转染干细胞专区会提供给你很好的解释。

orchard

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请问你们一般是自己构建还是找公司做呢？ 如果找公司的话哪家比较好？谢谢！