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大家用血清终止胰酶消化应该用多少?   [复制链接]

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楼主
发表于 2017-5-24 11:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我这有0.25%的胰酶,4ml左右应该用多少血清终止?胎牛和小牛血清有区别么?
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沙发
发表于 2017-5-24 11:39 |只看该作者
需要先配制终止液,一般是10%血清的培养基即可;再进行终止消化,一般是胰酶与培养基1:1终止,但建议你培养基稍微多一些,效果更好!
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藤椅
发表于 2017-5-24 12:50 |只看该作者
yanxm920 发表于 2017-5-24 11:39
4 W& p  a  C6 N) M( X+ {4 b- N: a; Y需要先配制终止液,一般是10%血清的培养基即可;再进行终止消化,一般是胰酶与培养基1:1终止,但建议你培养 ...
" x. U* ^9 s7 m5 o+ Q
谢谢,血清用区别胎牛和小牛么?另外,这终止液是要洗掉的吧,那我不用培养基而用PBS或盐水稀释血清是不是就不可以?
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板凳
发表于 2017-5-24 14:38 |只看该作者
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回复 zuishui 的帖子
; s2 S3 r4 n- T# w& u
1 S3 t- m5 N) Y6 c5 t9 U6 n- P您的问题提的有点笼统,不同来源的细胞所需要的消化液不同,终止消化的牛血清液有区别。至于终止液要不要洗掉要看你的细胞随后要做什么,牛血清残留是否干扰,PBS或盐水均可用于洗涤细胞,只要不影响细胞活性。
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报纸
发表于 2017-5-24 15:17 |只看该作者
回复 uslzhang 的帖子/ \- {2 d- s. v: u8 ]

. O% n  [, \* Q( E脐带间充质干细胞,传代培养
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地板
发表于 2017-5-24 16:05 |只看该作者
建议你换成trypLE,比传统的trypsin粉剂不知方便多少倍~
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发表于 2017-5-24 16:34 |只看该作者
回复 zuishui 的帖子% t- U. W' n: J( t0 u4 n" R
) E& E% C& J1 m
直接用盐水按盐水:消化液2:1的量终止消化,不过也要看你胰酶的浓度。

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发表于 2017-5-24 18:03 |只看该作者
10%血清的培养基,胰酶与培养基1:3。

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发表于 2017-5-25 08:34 |只看该作者
我用的是完全分装好的.0.05%EDTA混合液

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金话筒 优秀会员

10
发表于 2017-5-25 08:56 |只看该作者
回复 zuishui 的帖子% S$ K8 y9 f3 a# X- L6 o" P2 p
4 s* S, d  B- g) {9 O/ o- B
用完全培养基1:1
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