脐血单个核细胞分离出现很多白色沉淀的问题

tianangelt

用Ficoll法分离脐血单个核细胞，吸出白膜层离心后，离心管底有很大一块白色沉淀（明显细胞没有那么多，大概是平时细胞沉淀的3倍），洗涤接种到培养瓶中后，镜下看到底部有一层白色东西，细胞点缀在上面；高倍镜下观察，底部的白色东西也是小圆透亮，以前没有出现过这种情况，请问大家遇到过这种情况吗？是什么原因造成的呢？

wind789

0 ]$ ^# O% N1 `& T& m3 {# C
8 Z) o8 a. _+ Y4 W* W/ f. \; ?+ k2 j7 w难道是Ficoll密度不标准，血小板吸起来了？

lyj-0017

无图无真相

tianangelt

回复 wind789 的帖子
8 P1 O! M+ {0 T
4 R4 O3 [; H5 j$ c: ~( k' WFicoll一直都在用，之前没有出现过这个问题，也怀疑过是不是血小板，但洗涤的过程中怎么一点都没有洗掉呢，困惑……

tianangelt

回复 lyj-0017 的帖子& T8 X( {2 n" t. r

  A. j4 D9 t0 Q' T) g6 L( F( G有拍的照片，但不知如何上传

sdudai

我也出现过这种情况，应该是细胞碎片和血小板。

sdudai

是类似这个样子的小圆圈么还是其他的样子？这样子的话你的结果可能的原因就是细胞碎片和血小板了，你最好附一张图片。

mmssyyee

是不是ficoll的时间长了？

tianangelt

2013-10-23 11:10 上传

下载附件 (88.95 KB)

附照片一张，请大家指教。

tianangelt

回复 mmssyyee 的帖子
9 T  T0 T% p2 G, m( m1 ?2 `" l) x0 t
Ficoll什么的都是在保质期内，而且后来又用相同的Ficoll操作过，没有出现相同的现象。但是从操作上面也没有发现问题，实验条件也是一样的，不知道是不是血的问题。