如何用PCR扩增长的片段 - 实验室综合讨论区干细胞之家

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楼主

发表于 2010-1-11 21:12 |只看该作者 |正序浏览 |打印

最近，需要扩增较长的片段，约为7kb，有什么简便易行的好方法？请教！多谢！

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31楼

发表于 2014-5-23 00:21 |只看该作者

fast pfu 好像能搞定

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30楼

发表于 2014-5-14 22:26 |只看该作者

回复 weiyepan 的帖子: F: g% c: a( e% `! x; H; [+ l

你好，请问提完DNA后可以酶切后直接PCR吗？实验需要在PCR前酶切，做点突变验证，酶切位点是正常对照。

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石山巨石

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29楼

发表于 2014-4-13 00:17 |只看该作者

本帖最后由石山巨石于 2014-4-13 00:18 编辑 - z7 c8 v X+ q. G$ O( a

Betain 和 DMSO我记得是为了帮助GC rich DNA的解旋和长度没有什么关系

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细胞海洋

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小小研究员

28楼

发表于 2014-3-31 09:56 |只看该作者

回复 chenhuachen 的帖子+ [; o# O" T7 }4 A

. t4 n4 v3 k d |7 H, p. ?
你回复谁就点击对方回复帖子中的回复按钮然后输入内容像我这样
( @; l) j3 @8 h9 m6 s5 C
否则他会看不到

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27楼

发表于 2014-3-30 20:54 |只看该作者

大鼠的

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26楼

发表于 2014-3-30 20:54 |只看该作者

大鼠的

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25楼

发表于 2014-3-30 20:53 |只看该作者

能帮我看看这条引物吗？二聚体挺亮的，在ncbi找的算是比较好的，分析过。
TCCCCTGAAGACTGGATAACTG FWD。RSD TAGGTGCCAGGTCCAACAAC。一直摸不好条件，郁闷死了

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24楼

发表于 2014-3-30 20:45 |只看该作者

谢谢，请问甜菜碱要加多少?另外，不知道为什么加了dmso之后10%连条带都没有了，郁闷

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plasmid

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23楼

发表于 2014-3-25 16:20 |只看该作者

据说KOD高保真酶可以的

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