关于PEG8000的配制问题

huangcong1988

不知道40%的PEG8000怎么配制，有的说是直接用去离子水配，也有说用去离子水配后加氯化镁，到底是怎么配制呢？而且PEG8000是用来浓缩核酸的么？

徒手撩萝莉

想下载个文件

wscookie

学习一下

huangcong1988

回复 john7812x 的帖子% S5 J2 B$ O+ t

( [6 j' K1 }0 S! [文章中好像是收集慢病毒的过程吧，当然高速离心能在一定程度上提高慢病毒滴度，但是浓缩。。。

huangcong1988

回复 john7812x 的帖子
: Z' ?2 z, g4 \* s
! A& E* n7 Y' }' j4 M# t非常感谢！我是为了浓缩慢病毒

john7812x

回复 huangcong1988 的帖子
. ?/ d" m9 p/ u, ]4 y( V( x7 x1 G  I2 u% f% \
你是不是打算浓缩Lentivirus，来提高它的滴度, 为下步感染实验做准备?' U' @5 W! q+ D8 R2 `
还是要浓缩Lentivirus 的RNA？1 l/ u+ m0 h- D: B
' E6 y/ Z, o. {+ N
若是为了提高病毒滴度可以超速离心的方法：
5 J* z4 ^2 a% t8 S, T/ ^  d  j9 L! w: h/ S* R- x5 M& h
若是为了浓缩RNA，可以冷冻干燥，或沉淀RNA后再溶解，等等。$ F( i) z" h6 q# B# d2 V

5 C( Y8 U: x' F  B补充内容 (2011-11-1 19:54):
4 r5 F) \  H  I! l& u8 x7 v在这个超速离心的protocol 里用的是sucrose, 没有用PEG，可能和你实验室计划不同。

huangcong1988

回复 john7812x 的帖子9 @" q# C! f9 Q5 R2 R. ~  z( F

9 H' P  v# W: y  N# |有道理，慢病毒上清要纯化的话呢？慢病毒是RNA+外壳（蛋白），那去离子水是应该用DEPC水处理一下

huangcong1988

回复 john7812x 的帖子( h5 P& _7 C% G' m
4 q9 G8 q( m4 P0 p
不是提RNA，是浓缩，就是已经收集的慢病毒上清，想用PEG8000纯化一下，谢谢

john7812x

回复 huangcong1988 的帖子
+ v6 ]; o% T- q& |
: i3 k) i3 P% q( y) }  x; TPEG8000可以纯化RNA，如网页中所述：http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/16186.html! ]8 V1 b* h4 W/ \$ ]
但是，我没有用过PEG8000提取RNA，我用试剂盒提取小量RNA，或用Trizol提取大量RNA。
# F0 V& `! G2 e  |1 V$ ~8 A* H' e1 [; _; Z+ E3 O! e
40%（w/v）PEG8000 用去离子水配，如文件中黄色部分所示：
8 C- d9 H) H3 m( y; a" k. N  e3 E" t6 J6 Z
9 N/ u- |; U9 T" c. d! |1 `8 v) Z
假如你打算用PEG8000 提取RNA，建议用DEFC处理过的去离子水来配制。

huangcong1988

回复 zhusealin 的帖子
' T9 F5 Y* U. ^, q: M
  ]( `7 g, M4 g, B! Y是，PEG也用于细胞融合