再发图！用Ficoll分离脐血后的效果（15ml和50ml离心管）

huajie881026

前不久，做脐血MSC分离，用50ml离心管分离后，白膜层不清晰，故发了一帖http://www.stemcell8.cn/thread-58525-1-1.html
: ?! Q; |- T5 L! L- C& A/ S昨日又做了一次，分别用50ml和15ml离心管都做了，还是按Ficoll说明书来，500g  20℃  30分钟，结果50ml管还是“白雾”层，15ml就是大家所谓的“白膜”层（下图），可见是离心管的不同导致了分离后分层的区别。( N9 ?$ Y& J3 q5 K
可问题又来了，我100ml脐血，用100mlPBS稀释，再用100mlFicoll分离，这得要20个15ml离心管来分离啊，这得多浪费啊。不管怎么样，我还是用50ml的离心管先做了，我相信能得到MSC！！！; ?8 x7 F7 j7 r% a! Y1 O
. z  }: `. U9 {) Q% i

帝国黑骑士

回复 huajie881026 的帖子* N4 W5 U- M5 }4 `$ w
" j+ t  W9 Z! a( z
我觉的 用50ml 的离心管离心是的离心力可以再大一点，可能会好一些！比如700g ！个人觉得。

lm310389487

经验：离心力稍微调大些效果更好，大概就700g吧

huajie881026

嗯  下次我再改进，用700g以上再试试。
9 g$ v. L0 ^; P' [( |我一直用500g，30min，一方面是Ficoll说明书上这么说，一方面是下面一篇文献上也是这么做的9 _  ~- }' M* F5 O! J
他做了四百多分脐血，最后发现＞90ml脐血和2小时内操作是成功的关键, q9 ^4 Y# o& T& L( Q

xuehu20

回复 huajie881026 的帖子# @# U3 O! r4 J9 j; M  Y: c' Y
6 z% p4 z" ^' e5 Q/ s
你好，请问你说的文献有原文吗，能给我一份吗，谢谢

sdwzg119

Ficoll是国产的还是进口的？？我对比过国产淋巴细胞分离液和进口的之间的区别，进口的明显比国产的好的多！！粗略算算，大约进口的能比国产的得到多50%的细胞

huajie881026

sdwzg119 发表于 2012-8-2 14:56 ! i0 X- s6 d/ F
Ficoll是国产的还是进口的？？我对比过国产淋巴细胞分离液和进口的之间的区别，进口的明显比国产的好的多！ ...

% L  h7 w+ \. j7 L' p
进口的，GE的，2000+才600ml，分一次要用100ml，所以分一次心疼啊

huajie881026

xuehu20 发表于 2012-8-2 14:48
+ c+ Q, B2 p, I: ?3 O& S回复 huajie881026 的帖子
5 `/ S' D" ?; K5 X' u$ `( u6 B/ A. O" m3 m  n
你好，请问你说的文献有原文吗，能给我一份吗，谢谢

5 H; }) s$ ^! {. R: n9 w
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! ]2 j) q8 z  h  }# }$ e! Vhttp://www.stemcell8.cn/thread-58705-1-1.html

542177563

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" V: `8 J1 I) p& E  Z, I学习中

透明之蓝

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huajie881026 发表于 2012-8-2 10:38
. s0 g0 }3 l, G" l, z前不久，做脐血MSC分离，用50ml离心管分离后，白膜层不清晰，故发了一帖http://www.stemcell8.cn/thread-58 ...

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5 E( S& F( H6 h0 z$ }5 ^同样的分离液，15cm的肯定分离效果更好。
5 L' E0 L& E' w2 F/ W0 I肯花2000元买分离液，看来你是在搞科研，而且，脐血的MSC含量少不好养出来，综合你的情况，还是用15cm的吧！+ u6 D( q/ I& b: ~3 e  r
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By the way：养出来了通知一下，呵呵，我曾养过几次，情况都不好！祝好运！