PBMC没有分离出来

momoenn

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8 ], {( H( g4 n
今天第一次做病人的外周血分离，无单个核细胞。外周血取得上肢静脉血，无动员，按程序操作，没有分离出单个核细胞。大侠们遇到过这种情况吗？在线等待。

zhrt

无动员是啥意思？
" C4 j* k8 K) d6 J100ml能提很多啊，看看离心过程参数是不是有问题

momoenn

回复 heirrii 的帖子- V7 Y/ P$ c# R$ o
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稀释了，

momoenn

回复 weijunning 的帖子
% R& l1 l! s( S2 h; B
! u8 t' i9 U4 s8 V* I胃癌患者，淋巴结扩散，肺部也有扩散到。之前其他实验室都是这样无动员直接从上肢静脉抽血。老师，你说的这个血象差是什么情况呢？看血常规报告白细胞计数正常。

草胞

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同意levell意见，离心的加速度确实很关键，要缓升缓降。一般不至于一点PBMC分不到。最好分之前，先测一下含量比较好。另外，分离液有质量保证吧。不好的分离液，液面会不明显

ccst4838318

回复 heirrii 的帖子8 Q3 ~2 x- _' h" V& }: r8 k- k

9 _& ^4 z: J# F: u9 u6 `  i你怎么做的，怎么可能提不出来呢，正常的话100ml血液用Ficoll能提到1-2×108

weijunning

回复 momoenn 的帖子) e* _' e+ F6 [* }: E+ {3 N. N& j' u
. v4 G8 Q6 X/ I9 Q' I  j
请问这个病人是什么病人？如果是癌症患者，无动员直接从上肢静脉抽血，很难获得足够数量的PBMC，有的血象差的病人基本上分离不到白膜层。所以，建议还是先动员一下再采血比较好。

levell

血液细胞用PBS稀释后加入到淋巴细胞分离液上，离心，注意离心加速度调到最低，很关键，不然起步和停止速度过快就会把液面打散了
, D0 o& \8 i8 Q) P

heirrii

血液先稀释没

heirrii

100ml外周血，应该能分很多啊