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CIK的高效扩增技术   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

楼主
发表于 2011-2-21 16:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:
% S* ^2 Q" g# l3 O现有的方法:
  \* J" y5 W  @D0:IFN-r 1000u/ml) [& ^! h. S6 d. c& ^
D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
  ?2 n; @2 {! h* A( D以后每两天补充IL-2 。
# D+ X1 P2 N: z# r8 O) H7 [还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。8 k4 g& z$ X1 L" X$ C& @
谁有更好的方法,欢迎讨论!
# n+ w1 n0 K5 t* ^! F2 C
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-2-21 17:19 |只看该作者
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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藤椅
发表于 2011-2-21 20:20 |只看该作者
回复 get0715 的帖子
  _6 O; ?* [; R2 i' s' K* N% c- T4 ?8 }# u! j+ C% n
CD3又称OKD3
4 w; O: l7 W% H" D3 ^
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板凳
发表于 2011-2-21 20:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子7 W1 K0 x# d* R* y

: q" N) z0 O# i- J+ }多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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报纸
发表于 2011-2-22 22:42 |只看该作者
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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地板
发表于 2011-2-23 15:52 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子
" x+ @: \+ w6 H  S/ G( [/ A* U9 P# u2 O
恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?
0 I; \. g& W$ C- D怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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发表于 2011-3-3 16:17 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子
* j5 Q; ?% `! V4 W  w  z4 Y! A- k- P  E+ k( I9 _7 G
这个方法可以,我正在用
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发表于 2011-3-3 16:19 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
! T  Q/ f. g, b/ E3 g7 \/ J
) Q7 n% i! S, V6 t5 b0 B瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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9楼
发表于 2011-3-3 16:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
- T; T" D2 v( k5 u/ L
( Q: N: W5 c  E% K$ l8 z一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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发表于 2011-3-3 16:24 |只看该作者
回复 get0715 的帖子  [+ Y9 b3 U9 o# x- q5 E

# x. p! L2 L8 H7 z5 p0 w应该是叫OKT-3吧
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