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CIK的高效扩增技术   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

楼主
发表于 2011-2-21 16:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:
& y, c* I- L, I% @6 N/ J5 C+ u现有的方法:  |  E! e- ~( g7 W3 F
D0:IFN-r 1000u/ml" e, F/ }% y, m3 r
D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml# `) Y! N) D& B3 N$ x1 B$ y
以后每两天补充IL-2 。
) X- p* T) X( o+ `还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。. a0 ~, P) O" p. ^5 j& a7 P
谁有更好的方法,欢迎讨论!
1 h  p8 Z1 L9 {) [* V8 D
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沙发
发表于 2011-2-21 17:19 |只看该作者
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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藤椅
发表于 2011-2-21 20:20 |只看该作者
回复 get0715 的帖子0 `$ m) D: h- q: S, G7 W

% p( g; o0 R$ a. r' J1 QCD3又称OKD3' i. z5 b. n( t: z; J2 G! V
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板凳
发表于 2011-2-21 20:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
& g8 s, U/ i6 o/ l
0 \8 Q2 P2 X: O( R多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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realinter + 2 + 5 谢谢讨论
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报纸
发表于 2011-2-22 22:42 |只看该作者
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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地板
发表于 2011-2-23 15:52 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子7 u8 X' i+ h. @, x# b6 g! u

9 Q  \0 \& T, P/ @恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?) a( s& W1 U# B9 I. z- L  q
怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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发表于 2011-3-3 16:17 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子. N0 J& W( f1 w& H. v
( i5 e. m; F+ ^: D% P
这个方法可以,我正在用
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发表于 2011-3-3 16:19 |只看该作者
回复 realinter 的帖子- u5 O5 K, s2 d3 j: H

% _$ t' ~+ c0 Q6 s瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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发表于 2011-3-3 16:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子: v4 T% }) ], ~. k9 ~; l3 K* P
5 g9 ~/ F9 D+ E* B% F5 k6 {
一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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发表于 2011-3-3 16:24 |只看该作者
回复 get0715 的帖子% x) Z, F5 ~) y3 }( e- b+ K
" u4 S4 h! ?7 P% b- [) j
应该是叫OKT-3吧
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