关于间充质干细胞培养的一点经验

阳光无畏

回复 金戈 的帖子; t5 \; k4 K( U* _% \1 S

4 h/ X# J5 ]& L  S+ R09年伊朗人在《Nature Protocol》上一篇文章认为，通过frequent medium changes 及缩短胰蛋白酶消化时间便可，没有提及离心，整个过程都不离心，我也很好奇，到底是不是非离心不可？离心的利弊如何权衡？

weijunning

回复 2420527 的帖子0 g' N' @+ K' B5 b( K  r

* e$ a# N0 D0 i' B  @5 k& |冒昧地问一句 你们的无血清培养基是什么牌子的？

lql2006wh0

回复 dwl1209 的帖子
% ]4 D% t5 C' L4 T$ [
* k3 ?# @* D( c. b# ?bFGF浓度不同，作用不同，这里是用来促进细胞分裂生长的。# r3 g$ x5 M% C: P5 e  P/ ^# A9 W
lz是想把杂细胞去掉重复使用培养瓶的吧。

xiongwangyj

; b& Z! T% I1 p" h# ?
9 |5 [1 _! l; M! k$ u" l% Z6 f9 L" j
胰酶不清除肯定会影响细胞生长的。楼主第二次再消化吸掉细胞是因为还要继续使用那个培养瓶吗？

xiongwangyj

回复 yang179 的帖子
; Y% p. c7 ^: _- L+ u
8 A  O) e. g4 Y# d+ X这样吹打不会对细胞有损伤吗？那你们一般是消化多久呢？

309208770

回复 yang179 的帖子7 V, L- @5 v5 h

4 l+ u) _7 T; P8 }7 i9 z# ]! M0 M消化的差不多时，细胞已经成单细胞从瓶壁上脱落，此时还怎么将大部分胰酶去掉？？那不把细胞也丢掉了吗？

309208770

回复 yanmin 的帖子. `4 b2 I0 z+ X5 X4 u( {
! w8 r( Y: p' w! @4 X3 P" Q
细胞融合度太高了吧，太高的话消化时细胞就不容易呈单细胞脱落，镜下观察是成片脱落，这样的细胞团传代后是不容易贴壁的

309208770

回复 zhang0194 的帖子. `$ Z) M4 v" m& K) |  ?

$ v! Y+ |7 e% O- ~& Y我用的也是这个方法，

huanr006

学习中

zhang0194

回复 sdwzg119 的帖子6 `8 B& L" m7 M1 U) b. p  k& p

/ B. o* ^# j: V( x2 B我们做过小实验，E 的存在对细胞的生长影响极大，建议离心去E，传代按瓶子来说的话究竟是1：4.