关于间充质干细胞培养的一点经验

阳光无畏

回复 金戈 的帖子, G$ P: ?- z; I3 p- p

: g! {$ k/ r0 T( g9 a& ]6 }09年伊朗人在《Nature Protocol》上一篇文章认为，通过frequent medium changes 及缩短胰蛋白酶消化时间便可，没有提及离心，整个过程都不离心，我也很好奇，到底是不是非离心不可？离心的利弊如何权衡？

weijunning

回复 2420527 的帖子: M) j3 e1 q) o% E6 o- ?
2 u% a" h" B" |; M7 @
冒昧地问一句 你们的无血清培养基是什么牌子的？

lql2006wh0

回复 dwl1209 的帖子
6 R0 Z$ I4 |" W! L/ X& H' Z$ A8 @
bFGF浓度不同，作用不同，这里是用来促进细胞分裂生长的。- O# Z; p- u/ t2 ^  `8 X' ^6 C
lz是想把杂细胞去掉重复使用培养瓶的吧。

xiongwangyj

8 _+ N, l; A7 x9 \0 \- D# I+ [
- \, s- \) x8 }& z  N
胰酶不清除肯定会影响细胞生长的。楼主第二次再消化吸掉细胞是因为还要继续使用那个培养瓶吗？

xiongwangyj

回复 yang179 的帖子
5 E* {8 E+ q1 C9 B0 G
* w' k2 e, O" @7 V* X, F4 m这样吹打不会对细胞有损伤吗？那你们一般是消化多久呢？

309208770

回复 yang179 的帖子- s6 Z# S$ y; V  S! {( H! w  I, U9 o
& g, C7 v1 o: o9 \' N; k
消化的差不多时，细胞已经成单细胞从瓶壁上脱落，此时还怎么将大部分胰酶去掉？？那不把细胞也丢掉了吗？

309208770

回复 yanmin 的帖子
1 U  K$ F( s) y. M. L# m
3 c# [! u# R% [" D4 o9 u细胞融合度太高了吧，太高的话消化时细胞就不容易呈单细胞脱落，镜下观察是成片脱落，这样的细胞团传代后是不容易贴壁的

309208770

回复 zhang0194 的帖子
; t+ G. Q  g6 z2 B/ b" o7 O, o4 w3 K% u
我用的也是这个方法，

huanr006

学习中

zhang0194

回复 sdwzg119 的帖子
2 s9 A+ }5 b2 ^( y, h' ]- k8 c% s$ q& z+ B' D
我们做过小实验，E 的存在对细胞的生长影响极大，建议离心去E，传代按瓶子来说的话究竟是1：4.