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楼主: SKC-SFC
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造血干细胞流式检测结果分析     [复制链接]

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发表于 2015-7-4 08:23 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子. u  R& k# x" ~6 V
4 H6 @* L8 j* j$ s0 r3 n
1.CD34的门?不是从FSC/SSC散点图画门后检测3个补偿管(3个抗体)进行调补偿吗?, J" ^" r( ~& a" |
2.然后这个画门的位置在哪里呢?
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发表于 2015-7-4 08:39 |只看该作者
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发表于 2015-7-4 08:42 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子. L" K2 n9 N  P7 o& u8 l: ~  o
. e) \& S4 z" R! R
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发表于 2015-7-4 10:25 |只看该作者
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回复 SKC-SFC 的帖子
5 @8 \8 A1 I" }% Q6 X$ r9 z( a3 C& Y
1、我的意思是在你做同型对照或者cd34+检测之前就得用阴性对照把补偿什么的调好了,然后你的isotype跟你的cd34+用的是同一个protocol 就不需要单独调了$ f8 a% Y+ W, S: b
2、看你设的这些门没有啥大问题啊 你是哪个门不确定?2 g) N3 S6 C$ T
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发表于 2015-7-4 10:27 |只看该作者
最后cd34+ 0.8%正常啊
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发表于 2015-7-5 09:26 |只看该作者
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. y( F& x2 H/ _1 N* w7 K7 M; \. d; ]8 x0 `7 ?
都用同型对照了,还有什么阴性对照呢?难不成还得用细胞做阴性对照,不是多此一举吗?
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发表于 2015-7-5 09:29 |只看该作者
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# I  g8 j( b& R" F% v  {* u5 `2 i, @- s" ~1 k8 ^4 K
我们是用调整过的R4(在FSC/SSC的散点图中,显示R5,把R4的图复制过来后,把门的左侧划到200位置)作为最终的结果,大概0.2%左右。
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发表于 2015-7-5 09:32 |只看该作者
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; N1 K* ~: s; t. u, v7 [* e; h$ o5 o8 ?. i+ ~7 Y8 ?# G
大部分门的设置没有太大的问题,有两处有疑惑,第一个在调补偿的时候,同型对照也就是阴性对照的管的划门位置(R1)怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里?

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发表于 2015-7-5 09:34 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子( v; }" G0 q  X) g8 d5 {
) Q1 K" i7 y0 x: Y4 `
我们此次是检测CD34+CD45+CD133,所以我们按三色的检测标准。
! \9 Y* _4 \) a; m% ?4 a1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞" _6 Z. F, |0 I' D" b
2.FITC+PerCP+APC的补偿管,共3管
1 ?  k8 D" K$ O9 @0 F. g! w$ L4 \3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体
( z2 Y! K3 ~# {% F' x6 G2 @+ c共5管
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发表于 2015-7-5 12:20 |只看该作者
回复 SKC-SFC 的帖子3 Q$ z: d% u9 Q6 p( t4 }( y* r
$ f" `& Y3 p1 n+ P
晕 阴性对照不是让你调补偿的么,同型对照不是做实验的isotype么
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