脐带间充质干细胞分离培养

jojo1988509

回复 babyrose66 的帖子$ d8 D) D. [& c  g: _* [

6 ^1 H' J3 f1 @) A; R; w* ~我晕，你组织块都是飘着的，你还指望能爬出细胞。
% U% ~* y; S! P6 ~  ?最开始让组织块贴壁那一步就很重要啊！一般需要剪得很碎，这个时候你那一团肉糜本来就是黏黏的了，然后把组织块放进去，倒置培养瓶，不要加培养基，等3-4个小时后，再加少量培养基静置，就2-3ml，淹过组织块就行了，不能太多，或者你等不了，你要过夜的话，加点培养基，倒置，即你的培养基在底部，你的组织块在上面，这样就不会让组织块干了。

20062926

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6 ]2 u; T2 B! y5 t1 k7 H5 B- Z( s$ e# f4 h# F: c
你说的胶原酶是酶消化法  那个成本要高一点  脐带就用组织块培养法就行了  胎盘干细胞有些实验室用的酶消化，没有用胎牛血清  用的一种人工合成的血清替代品因子，胎牛不能用于人体治疗.....

20062926

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  a: C. a: H3 m8 V放多少小时这个要看你自己了   只要贴紧就好了，我试过放过夜  也能长出来，长出细胞的多少也差异不大，至于您说的会不会放太久，太干，这个完全可以放心，一是你分离华通式胶的时候会带有生理盐水，二是如果气浴培养箱的话，培养箱内的温湿度完全能保证组织块的活性

20062926

回复 edwardellen 的帖子% G/ T2 _% m" N* [3 ]4 E
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自己小孩存自己做  那你怎么保存呢  除非你们有放细胞的罐子，还有就是你们实验一般用胎牛 小牛吧，这个不能用于人体治疗的哟

edwardellen

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  ?* [, a# ^* \+ c实验室有液氮罐的，不过存的都是实验用的细胞。) c7 }: L% T+ ?& z5 v' `. Q" r( Z
排除利益因素，您觉得自己花钱存这个脐带干细胞意义有多大？! \6 ~/ B2 s, [4 V- Y$ M8 t
脐带血的造血干现在是可以用，脐带间充质让不让用？有那种给自己家人用的么？

20062926

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# D, p, g8 T6 k
. u4 I7 |' j) R- D6 z! K* e脐带现在还是有人用，国际不允许，但是只要病人自己要用，不就行了，签协议，脐带排异较小，家人都能用，只是现在基本都是用在免疫调节上，但是发现空间巨大，你存二十年，谁知道二十年后会研究出间充值的什么功能，万一将来研究出某些救命的功能呢，所以有条件存着还是可以的，毕竟分期付款，除了第一年多点，后面每年才几百块，都不算钱

ywx6302706008

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6 L! Y# i) d! o. Y- Z  U  S回复 20062926 的帖子8 D7 e0 _4 A3 l
我也在养脐带间充质，0.1%胶原酶和透明质酸酶消化法，消化3～4小时，，培养三四天后，很少有细胞贴壁，就算有零星几个，也不是那种细条状的，而是五花八门的形状，状态也很差，有黑点点，感觉基本活不了，不知道您是否用过酶消化的方式养脐带。还有就是以你这么多年的经验来讲，您觉得组织块法比较好还是酶消化法好

20062926

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$ K0 S; ~2 G, w) {% u( S
* K: R/ y( V- Z' U必然是组织块法比较好，成本低，对细胞无伤害，养出来的细胞状态较好，酶消化法有点就是细胞制备时间缩短了，反正在我晓得的国内这些脐血库制备间充质，脐带用的组织块法，胎盘用的酶消化法，因为胎盘中组织成分复杂一些，分离出来的组织间充质含量较小且不易分离组织，所有大家都是用的酶消化法，酶消化法较组织块法难操作一些，参数影响很大

ywx6302706008

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您好，可否问一下您是哪家脐血库的呢，我有个同事是上海脐血库的，他们用的是酶消化法。虽然说酶消化法时间短，只是细胞出来的时间比较短吧，但细胞状态很差，以后贴壁增殖都挺困难的，最后获得相同细胞的所需时间不一定短吧，我个人觉得是这样，您觉得呢。

20062926

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# i/ e, d0 C$ Q! r4 C+ ~4 q  D6 M# ~% W: L& Y
如果能用组织块法就用组织块法吧  即简单又经济  对好像上海库脐带也是用的酶消化，酶消化时间肯定要短几天，后面出现状态不好只是因为参数和操作的问题，因为酶消化法经验要求较高吧，每个人做出来的状态不一样，组织块法对操作要求不高