不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。+ ~, p# T. P9 _, c

  U' ]3 J3 X; a; U8 `, e0 `& i基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1. j) p' @, B7 ]4 B, N3 u
TOP10菌株# g+ h$ J/ @( j4 y

$ d6 W- r3 U, t( X* H" ~该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。+ p5 K; r0 z" ]+ u3 i2 a9 L

7 z! Y. V$ M2 ~+ C6 I基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG
9 m' p. e7 E7 T" E1 t( k可以看看别人博客里写的, x- J* ~9 w) d
http://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。
# }4 ]  n  i" O5 ~' s4 x5 HTOP10转化效率低很多，不怎么好用。& ]0 O$ L( N  w* U. P4 h0 {0 ~
Stbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a* t; r! A; ~* `! P& ^. Q
效率是反过来的

石山巨石

回复 老十 的帖子- d  M4 L+ r8 |7 P
$ o2 U& |/ x# q  c8 s
请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

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% d4 \* N  t0 p$ X
; Q1 X8 J/ {! c4 X* \1 V* d多谢哈

zm19900508

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$ I% M3 a; R! T
谢啦

zm19900508

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3 ~( `" T' E- h9 h6 K- u8 [* _, E! w5 l0 J5 W0 T# K- F* T
我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。9 E# a, B' _) {9 F5 q  o
DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。
  D- e( @: w  E. I. F使用建议DH5a

weiyepan

回复 zm19900508 的帖子1 [8 _( H* h$ g& Q! C

5 u( M% S1 ^- @% NshRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？